Microsistema per la rapida
identificazione degli Enterobatteri
Questo sistema è un metodo rapido che consente l’identificazione di enterobatteri ossidasi negativi di particolare interesse clinico. Consiste in 18 prove biochimiche che si effettuano ognuna in un piccolo pozzetto che contiene il substrato corrispondente sterile e disidratato. Tutti insieme formano una piccola piastra ,di materiale plastico, di facile uso .L’utilità di questo sistema è nella velocità di attuazione, impiego di materiale minimo , diminuzione dei tempi di lavoro , di spazi necessari e della possibilità di utilizzare piccole quantità microbiche.
L’identificazione
si ottiene grazie ad un codice numerico ricavato dai risultati positivi o
negativi corrispondenti alle prove biochimiche. Grazie ad esso si può risalire ,
con un grado più o meno alto di precisione, al genere di Enterobatterio esaminato.
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Test |
Prova biochimica |
Descrizione reazione biochimica |
R. positivo |
R. negativo |
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1 ONPG |
orto-nitro-fenil-beta-d-galattopiranoside |
L’enzima beta-ghalattosidasi idrolizza
l’orto-nitrofenil-beta-d- galattoside a galattosio e orto-nitrofenolo
che è di colore giallo |
giallo |
incolore |
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2 LDC |
lisina |
La lisina decarbossilasi trasforma la lisina in
una sostanza basica (cadaverina) e anidride carbonica. Questa ammina causa
una variazione di pH (basico) che fa virare l’indicatore da giallo a
rosso |
rosso |
giallo o arancio |
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3ODC |
ornitina |
L’ornitina decarbossilasi trasforma
l’arginina in una ammina primaria (putrescina) e anidride carbonica.
Questa rende il pH basico e fa
virare l’indicatore da giallo a rosso |
rosso |
giallo o arancio |
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4ADC |
arginina |
L’arginina decarbossilasi trasforma
l’arginina in citrullina ed ammoniaca che rende il pH basico e fa
virare il’indicatore da giallo a rosso |
rosso |
giallo o arancio |
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5 PD |
fenilalanina |
La deaminazione della fenilalanina produce
l’ac. Fenil-piruvico che
produce una variazione di colore da giallo a marrone o nero in presenza di
sali di ferro |
marrone o nero |
giallo |
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6 CIT |
citrato |
L’utilizzazione di citrat come unica fonte
di carbonio produce alcalinizzazione dell’ambiente facendo virare
l’indicatore da blu a verde |
blu o verde scuro |
verde |
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7 UR |
urea |
L’idrolisi enzimatica dell’urea a
causa della produzione di ureasi da parte del batterio, produce la formazione
di anidride carbonica e ammoniaca che produce alcalinizzazione del terreno |
rosso magenta |
giallo o arancio |
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8 H2S |
idrogeno solforato |
La riduzione del tiosofato produce idrogeno
solforato che in presenza di Sali di ferro diventa un precipitato nero
(solfuro di ferro) |
nero |
assenza di precipitato nero |
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9 MAL |
malonato |
L’utilizzazione del malnato come unica
fonte di carbonio produce alcalinizzazione con il viraggio
dell’indicatore da verde a blu |
blu o verde |
giallo |
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10 VP |
Voges-Proskauer |
L’acetoina è una sostanza
intermediaria prodotta dal metabolismo fermentativo del glucosio. La sua
presenza è indicata per l’aggiunta di due gocce di alfa-naftolo
e una goccia di idrossido di sodio al 40%. Dopo 15-20 minuti compare un
anello rosso cardinale |
anello rosso cardinale |
assenza di colore |
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11 IND |
indolo |
I’ indolo (incolore) , derivato dalla
scissione del triptofano, viene messo in evidenza dall’aggiunta del
reattivo di Kovacs che conuna reazione immediata produce un complesso di
colore rosso |
anello rosso |
assenza di colore |
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12GLU |
glucosio |
La fermentazione del glucosio produce un
‘acidificazione dell’ambiente: l’indicatore vira dal verde
al giallo |
giallo |
blu o verde |
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13MAN |
mannitolo |
La fermentazione del mannitolo produce un ‘acidificazione
dell’ambiente: l’indicatore vira dal verde al giallo |
giallo |
blu o verde |
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14INO |
inositolo |
La fermentazione dell’inositolo produce un
‘acidificazione dell’ambiente: l’indicatore vira dal
verdeal giallo |
giallo |
blu o verde |
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15SOR |
sorbitolo |
La fermentazione del sorbitolo produce un
‘acidificazione dell’ambiente: l’indicatore vira dal verde
al giallo |
giallo |
blu o verde |
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16SAC |
saccarosio |
La fermentazione del saccarosio produce un
‘acidificazione dell’ambiente: l’indicatore vira dal verde
al giallo |
giallo |
blu o verde |
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17ARA |
arabinosio |
La fermentazione dell’arabinosio produce un
‘acidificazione dell’ambiente: l’indicatore vira dal
verde al giallo |
giallo |
blu o verde |
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18RAF |
raffinosio |
La fermentazione del raffinosio produce un
‘acidificazione dell’ambiente: l’indicatore vira dal verde
al giallo |
giallo |
blu o verde |
